Product Center
棘球絳蟲通用PCR檢測試劑盒說明書上海聯(lián)祖生物相關產(chǎn)品:LR檢測試劑盒ASK1/MAPKKK5 細胞凋亡信號調節(jié)激酶1/絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原Maspin (mammary serine protease inhibitor) 抑癌基因抗原
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關文章
RELATED ARTICLES?
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱 | 棘球絳蟲通用PCR檢測試劑盒說明書 |
英文名稱 | Echinococcus spp.PCR |
貨號 | LZP6667 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
人骨成型蛋白7(BMP-7)elisa試劑盒Anti-CBLN2 Antibody研究領域 腫瘤 信號轉導 通道蛋白 糖蛋白
人蛋白磷酸酶2(2A)催化亞基β亞型(PPP2CB)elisa試劑盒Anti-CBLN3 Antibody研究領域 免疫學 發(fā)育生物學 信號轉導 干細胞 結合蛋白 細胞骨架
人γ干擾素(IFN-γ)elisa試劑盒Anti-CCAR2 Antibody研究領域 腫瘤 心血管 細胞生物 信號轉導 細胞類型標志物 細胞骨架
人β內啡肽(β-EP)elisa試劑盒Anti-CBR3 Antibody研究領域 細胞生物 信號轉導 激酶和磷酸酶 細胞骨架
人G蛋白偶聯(lián)雌激素受體1(GPR30)elisa試劑盒Anti-CBLN4 Antibody研究領域 細胞生物 信號轉導 結合蛋白 細胞類型標志物 細胞骨架
馬睪酮(T)elisa試劑盒Anti-CBX4 Antibody研究領域 細胞生物 信號轉導 內分泌病 新陳代謝
雞白介素10(IL-10)elisa試劑盒Anti-CCDC102A Antibody研究領域 心血管 神經(jīng)生物學 細胞膜受體 G蛋白偶聯(lián)受體
大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa試劑盒Anti-CCDC102A Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學 細胞膜受體
大鼠鈣結合蛋白(CR)elisa試劑盒Anti-CCDC102B Antibody研究領域 心血管 細胞生物 神經(jīng)生物學 生長因子和激素 細胞膜受體 內分泌病
大鼠鈣調蛋白依賴性蛋白激酶激酶(CaMKK)elisa試劑盒Anti-CCDC102A Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 糖尿病
大鼠不對稱二甲基精氨酸(ADMA)elisa試劑盒Anti-CCDC88A Antibody研究領域 腫瘤 細胞凋亡
大鼠α烯醇化酶(α-elase)elisa試劑盒Anti-CCDC106 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 轉錄調節(jié)因子
大鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa試劑盒Anti-CCL14 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 轉錄調節(jié)因子
大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒Anti-CCDC88A Antibody研究領域 細胞生物 神經(jīng)生物學 細胞類型標志物 細胞骨架
倉鼠瘦素(LEP)elisa試劑盒Anti-CCL20 Antibody研究領域 細胞生物 神經(jīng)生物學 細胞膜受體
3-甲硫基-1-己醇 三乙?;?磺酸酐[強效三乙?;噭 γ-丙基甲基二乙氧基硅烷
2-(*氧基)苯甲酰 三乙酸異丙酯 雙二苯基膦甲烷
2-(二甲氧基) 三辛酸甘油酯 1,2-雙(二甲基瞵)乙烷
4--3-三 異酸2,4,6-三苯酯 3-甲基-3-丁烯-2-
2-Chloroethyl ethyl sulfide 2-乙基乙基硫醚 693-07-2
1-Methoxy 1-甲醚 2216-69-5
Dodecyl methyl sulfide 魚腥草醚 3698-89-3
Propyl sulfide 二丙基硫醚 111-47-7
大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 ,英文名: Apo-H ELISA Kit
人抗心肌抗體(AMA)ELISA檢測試劑盒HumanAi-myocardialaibody,AMAELISAKit 96T/48T
大鼠白介素4(IL-4)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 4,IL-4 ELISA KIT
CLIAKitfoGF-Beta1ELISAkit大鼠轉化生長因子β1規(guī)格:48T/96T
全組織總脂酶活性格莫瑞(Gomori)染色試劑盒50次
ELISAKitai-RV人抗狂犬病毒抗體規(guī)格:48T/96T
棘球絳蟲通用PCR檢測試劑盒說明書人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒英文名稱:Human major histocompatibility complex Ⅰ,MHCⅠ/HLAⅠ ELISA Kit*
人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒英文名稱:Human major histocompatibility complex Ⅱ,MHCⅡ/HLA-Ⅱ ELISA Kit進口/分裝
人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒英文名稱:Human anti-alpha-Fodrin IgG/IgA,α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit *
人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)ELISA試劑盒英文名稱:Human InterferonαAntibody,IFNα-Ab ELISA Kit*
人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-albumin antibody,AAA ELISA Kit*
人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-typhus antibody ELISA Kit*
人抗表皮細胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒 英文名稱:Human epidermal basement membrane zone,EBMZ ELISA Kit進口/分裝