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產品名稱 | 反芻獸埃立克體PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Ehrlichia ruminantiumPCR |
貨號 | LZP6677 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
豬白介素12(IL-12/P70)elisa試劑盒Anti-CELF1 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 腫瘤細胞生物標志物
小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)elisa試劑盒Anti-CELSR2 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 信號轉導
小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)elisa試劑盒Anti-CELSR3/Flamingo homolog 1 Antibody研究領域 細胞生物 神經生物學 G蛋白偶聯受體
小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)elisa試劑盒Anti-CELSR3 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 神經生物學 細胞粘附分子 細胞類型標志物 細胞骨架
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)elisa試劑盒Anti-CENPQ Antibody研究領域 腫瘤 信號轉導 轉錄調節(jié)因子 激酶和磷酸酶
小鼠β1腎上腺素能受體(β1AR)抗體elisa試劑盒Anti-CENPU Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 細胞凋亡
小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)elisa試劑盒Anti-CEP135 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 細胞凋亡
人降脂素(Adipsin)elisa試劑盒Anti-CEP131 Antibody研究領域 腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學 信號轉導 脂蛋白 新陳代謝 線粒體
人補體片斷5a(C5a)elisa試劑盒Anti-CEP135 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 趨化因子 b-淋巴細胞
人表皮生長因子受體2(sp185/Her2)elisa試劑盒Anti-CEP152 Antibody研究領域 腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學 信號轉導 干細胞 細胞膜受體 細胞表面分子 血管內皮細胞
人MAP磷酸酶雙特異性磷酸酶1(DUSP-1)elisa試劑盒Anti-CEP170 Antibody研究領域 細胞生物 神經生物學 信號轉導 細胞粘附分子 細胞表面分子 細胞膜蛋白
人F-肌動蛋白(F-actin)elisa試劑盒Anti-CEP152 Antibody研究領域 細胞生物 神經生物學 信號轉導 轉錄調節(jié)因子 激酶和磷酸酶 表觀遺傳學
人CD8分子(CD8)elisa試劑盒Anti-CEP170 Antibody研究領域 信號轉導 轉錄調節(jié)因子 結合蛋白 細胞類型標志物
人CD68分子(CD68)elisa試劑盒Anti-CEP290 Antibody研究領域 細胞生物 神經生物學
人8異前列腺素(8-iso-PG)elisa試劑盒Anti-CEP290 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 表觀遺傳學
4--3-甲氧基苯 2,2,4,4-四甲基戊烷 烯丙基磺酸鈉
二羥丙茶堿 1,1,3,3-四甲基二硅氧烷 1,4-丁磺酸內酯
對 四甲基二硅氮烷 碳酸鋅
2--3-苯 原三丁酯 磷鎢酸
10-UNDECEN-1-OL 10-十一烯醇 112-43-6
PHENYL PROPARGYL 苯基炔丙基醚 13610-02-1
4-Iodoanisole 4-苯甲醚 696-62-8
3-Chloro-2-methylpropene 3--2-甲基-1-丙烯 563-47-3
大鼠粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC1 ELISA Kit
Mouse lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 小鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒
MouseIerleukin1α,IL-1αELISAkit 小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit人胰高血糖素樣肽1規(guī)格:48T/96T
吸煙者人體肺組織S9組分(5毫克/毫升)500微升
ELISAKitSDF-1β/CXCL12大鼠基質細胞衍生因子1β規(guī)格:48T/96T
反芻獸埃立克體PCR檢測試劑盒價格人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒英文名稱:Human seleprotein 1,SEP1 ELISA Kit進口/原裝
人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒英文名稱:Human bone sialoprotein,BSP ELISA Kit*
人骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒英文名稱:Human bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit*
人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒英文名稱:Human Bone Morphogenetic Protein 6,BMP-6 ELISA Kit進口/分裝
人骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒英文名稱:Human osteonectin,ON ELISA Kit進口/原裝
人冠狀病毒(Coronaviruses IgG)ELISA試劑盒英文名稱:Human Coronaviruses IgG ELISA Kit*
人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA試劑盒英文名稱:Human Caspase 12,Casp-12 ELISA Kit進口/分裝
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。