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非洲分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:FAK檢測(cè)試劑盒其組成成份及含量常受供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件等因素的影響
產(chǎn)品分類(lèi)
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1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 非洲分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 |
英文名稱(chēng) | Mycobacterium africanumPCR |
貨號(hào) | LZP6996 |
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
0.4% 臺(tái)盼藍(lán)報(bào)價(jià)Anti-MLK2/MAP3K10研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 干細(xì)胞 表觀遺傳學(xué)
MEM(含非必需氨基酸、Earle平衡鹽、L-谷氨酰胺、雙抗)價(jià)格Anti-MST4研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架
毛冬青皂苷甲實(shí)驗(yàn)步驟Anti-MCK10/CD167a/DDR1研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
胰酶大豆酵母浸膏肉湯保存Anti-Metal ion transporter研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 表觀遺傳學(xué)
碘化丙啶使用說(shuō)明書(shū)Anti-Midlin研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
維生素B6使用說(shuō)明書(shū)Anti-MAdCAM-1研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞分化 表觀遺傳學(xué)
新生霉素溶液 ,50mg/mL5mL多少錢(qián)Anti-Maspin研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 干細(xì)胞
NP-40 裂解液100mL多少錢(qián)Anti-M2-PK (pyruvate Kinase M2)研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 干細(xì)胞 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)菌及病毒 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 細(xì)胞表面分子 表觀遺傳學(xué)
人核轉(zhuǎn)錄因子κBp65Elisa Kit說(shuō)明書(shū)Anti-MAG-a/b研究領(lǐng)域 發(fā)育生物學(xué) 干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
豬17羥孕酮(17-OHP)elisa試劑盒Anti-MEK1/2(MAPKK1)研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 干細(xì)胞
小鼠極低密度脂蛋白受體(VLDLR)elisa試劑盒Anti-Matriptase研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 通道蛋白 細(xì)胞膜蛋白
山羊C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa試劑盒Anti-MBP研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶
人穿孔素/成孔蛋白(PRF1/PFP)elisa試劑盒Anti-Melama HMB45/Melama/Melan-A/MART-1研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞骨架
倉(cāng)鼠E選擇素(SELE)elisa試劑盒Anti-MCP1/CCL2研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞
絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)elisa試劑盒Anti-MDM2研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞骨架
CD34 CD34抗原(細(xì)胞表面的唾液粘蛋白)Wnt1 信號(hào)通路Wnt1抗體
對(duì)香豆酸CD38(mouse, rat) CD38多肽(小鼠、大鼠)WNK4 WNK4抗體
延胡索乙素CD38(human) CD38抗原(人)WNK3 protein 絲氨酸/蘇氨酸激酶家族成員的基因WNK3抗體
羊藿苷CD36 CD36(多肽)WNK1 賴(lài)氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體
柚皮素CD7 CD7抗原WISP39/FKBPL p21調(diào)控蛋白WISP39抗體
原花青素CD40L(CD40 Ligand/TNFSF5/CD154) CD40L抗原WISP1 Wnt1信號(hào)通路蛋白1抗體
標(biāo)準(zhǔn)品CD44 CD44抗原 (多肽抗原)WIPF2 WASP結(jié)合蛋白抗體
柚皮苷Argireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3WIP1/PPM1D 原癌基因WIP1抗體
巖白菜素GHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2) 醋酸促生長(zhǎng)激素釋放肽2WIG-1/PAG608 (3E4) 野生型P53誘導(dǎo)基因1單克隆抗體
鹽酸青藤堿GHRP-6 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 6) 醋酸促生長(zhǎng)激素釋放肽6WIG-1/PAG608 野生型P53誘導(dǎo)基因1抗體
非洲分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格花生凝集素(PNA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT10克
槐凝集素(SJA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT25克
(AFT)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT,避光1克
雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
雞17羥皮質(zhì)類(lèi)固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
雞17-類(lèi)固醇(17-KS)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100毫克
雞B因子(BF)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100毫克