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瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒Insulin 胰島素100 ul膀胱癌抗原(UBC)ELISA試劑盒Insulin (pig) 胰島素 (豬)100 ul伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒rInsulin 抗重組胰島素1
產(chǎn)品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產(chǎn)品名稱 | 人線粒體DNAPCR檢測試劑盒價格 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7781 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
碲標準溶液(100μg/ml,基體:HCI)Phospho-SLP-76 (Ser376) (D7S1K) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)酸氫氨鈉
銩標準溶液(1000µg/mL,基體:10%HCL)Phospho-SLP-76 (Ser376) (D7S1K) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)5,6-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-IJ]喹啉
釩標準溶液(500mg/L,溶劑:水)FANCD2 (D5L5X) Rabbit mAb硝基-1,二硫酸鹽
釩標準溶液(100mg/L,基體:1%HCI)HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb5-溴-2-(硫代甲基)嘧啶
鐿標準溶液(1000μg/ml)BCAT1 (D4V2T) Rabbit mAbN,N-二異基三鹽
鐿標準溶液(1000μg/ml in 10%HCl)Phospho-Met (Tyr1234/1235) Blocking Peptide4,5-二-2-甲基噠-酮
鋅標準溶液(1000mg/L,溶劑:1%鹽酸)Ibrutinib3,4',5-*氧基-反-二代
鋅標準溶液(500mg/L,溶劑:1%鹽酸)ROR1 (D6T8C) Rabbit mAb2-ACETAMIDO-BROMOANISOLE
二溴一標準溶液(1.0mg/ml,基體:甲)MUC1-C (D5K9I) XP® Rabbit mAb甲基-1-萘甲酸
2,二甲酚標準溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)ERG (A7L1G) Rabbit mAb (PE Conjuga)METHYL IMIDAZO[1,2-A]PYRIDINE-5-CARBOXYLA
3,二甲酚標準溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)TKS5 Antibody3,4'-二氨基二烷
鄰二甲酸二酯標準溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)TRPC6 (D3G1Q) Rabbit mAbN,N'-基雙酰
鄰二甲酸二丁酯標準溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)Phospho-CaMKK2 (Ser495) Antibody雙(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)化銅
2,二溴酰標準溶液(490mg/L,基體:酸酯)Orexin (D6G9T) Rabbit mAb氧基
1,1-二烷標準溶液(1.00mg/ml,基體:甲)CaMKK2 (D8D4D) Rabbit mAb
反式-1,2-二標準溶液(1.00mg/ml,基體:甲)eIF4E (C46H6) Rabbit mAb (Biotinylad)7-甲氧基咪唑并[1,2-A]吡啶-8-甲
鄰二甲酸二正壬酯標準溶液(136.0μg/ml,溶劑:甲)SIX1 (D5S2S) Rabbit mAb6-酰氧基正己酸甲酯
標準溶液(1000μg/ml,溶劑:二硫化碳)CAR (D3W3G) Rabbit mAb1-BOC-5-(METHOXYCARBONYL)INDOLE-2-BORONIC ACID
包蟲IgG ELISA試劑盒Inhibin Beta C 抑制素βC20 ul
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百日咳病毒(IgM)ELISA試劑盒Insulin Receptor Alpha 胰島素受體α100 ul
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16號染色體開放閱讀框48抗體Ehretioside B中文名:別名:分子式:C14H177
間隙連接蛋白36抗體5-(6-Hydroxybenzofuran-2-yl)-2-(3-methylbut-1-enyl)benzene-1,3-diol中文名:別名:分子式:C19H18O4
12號染色體開放閱讀框61抗體Resorcil中文名:別名:1,3-Benzenediol分子式:C6H6O2
12號染色體開放閱讀框63抗體Moracin C中文名:桑辛素C別名:分子式:C19H18O4