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iNOS誘導(dǎo)型一氧化合成酶ELISA試劑盒的熱銷產(chǎn)品:NKA/FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)激肽A抗體IgG2-羥吡啶-N-氧化物 98%NK-1/Substance P Receptor /FITC 熒光標(biāo)記P物質(zhì)受體抗體IgGα-D(+)-五酰葡萄糖 98%NK-2R/FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體IgG二硅油 viscosity 0±8mPa.sNKB/FITC 熒光
產(chǎn)品分類
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公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
iNOS誘導(dǎo)型一氧化合成酶ELISA試劑盒 | iNOS ELISA Kit | 48T/96T | LZ-E028657 |
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒內(nèi)酯異 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.7%(GC)DL-蘋(píng)果 AR,99.5%
熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒垂盆鈔草甙(治肝炎藥),垂盆草甙異 >99.0% (GC)(含100ppm BHT穩(wěn)定劑)L-蘋(píng)果 98%
熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒垂石松 A異佛爾 97%L-蘋(píng)果 CP
熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒槐雙氫黃異 ACS, ≥99.5% 順二 AR,99.5%
熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒槐亭烯異癸酯 98%,含70-100ppm對(duì)苯二酚穩(wěn)定劑順二 CP,99%
熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒桐阿亭烯月桂酯 96%順二 藥用級(jí),EP,USP
肌球蛋白(MYS)試劑盒桐酚素α-烯 >99.0%(GC),250ppm MEHQ做穩(wěn)定劑D-蘋(píng)果 99%
肌球蛋白(MYS)試劑盒桐特靈α-烯 >99.0%(GC),250ppm MEHQ做穩(wěn)定劑單硬脂甘油酯 >60.0%(GC)
凝溶膠蛋白(GS)試劑盒五加甙 C異丁(MIBC) 99%單硬脂甘油酯 99%(GC)
凝溶膠蛋白(GS)試劑盒粗毛甘草素 A乙酰乙酯 CP,98%L-半胱氨 ≥98%,非動(dòng)物源,用于培養(yǎng)
C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒粗毛羊藿異丁 >99.5%(GC)安息香 99.5%
C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒醋獨(dú)活屬壬酚 GR聯(lián)苯酰 99.0%
固(ALD)試劑盒達(dá)瑪二烯乙酯壬酚(混合物) SU安息香二 99%
固(ALD)試劑盒達(dá)瑪烯二II壬酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品1-羥環(huán)己苯 98%
肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒大豆腦 I對(duì)壬酚 85%2-羥-2- 97%
肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒大豆腦 II對(duì)壬酚 98%乙(95%) AR,95.0%
iNOS誘導(dǎo)型一氧化合成酶ELISA試劑盒熒光標(biāo)記是研究細(xì)胞凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化及生化學(xué)變化都可以通過(guò)熒光標(biāo)記的的方法而檢測(cè)出來(lái),從而區(qū)別鑒別出正常細(xì)胞、壞死細(xì)胞或檢測(cè)細(xì)胞周期。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種DNA 結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為536nm 和617nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無(wú)膜通透性,不能透過(guò)活細(xì)胞膜,只能染死細(xì)胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞不能著色,壞死細(xì)胞呈強(qiáng)紅色熒光。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期時(shí),凋亡細(xì)胞因內(nèi)源性核酶被激活,使DNA 廣泛降解、斷裂,DNA 結(jié)構(gòu)發(fā)生劇變,隨著凋亡的進(jìn)程,DNA 斷裂產(chǎn)生的小分子量DNA 溢出胞外,細(xì)胞總DNA 量降低,于正常G0/G1 細(xì)胞群前出現(xiàn)一DNA 低染細(xì)胞群,即G1 峰前出現(xiàn)亞二倍體峰(sub-G1)或稱A0 細(xì)胞群,即凋亡細(xì)胞群。用本試劑盒的PI 直接對(duì)細(xì)胞DNA 染色后,進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析,即可檢測(cè)到凋亡細(xì)胞DNA 的變化。
儲(chǔ)存:2-8℃,避光,有效期6個(gè)月。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。