Product Center
火雞支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格上海聯(lián)祖生物相關產(chǎn)品:CK檢測試劑盒 在早期由于尚未建立對蛋白質(zhì)抗原進行分析的方法,為研究抗原性的化學本質(zhì)造成了困難
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關文章
RELATED ARTICLES組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
?
產(chǎn)品名稱 | 火雞支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格 |
英文名稱 | Mycoplasma meleagridisPCR |
貨號 | LZP7036 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
淋巴細胞分離液使用說明書Anti-Manic Fringe/MFNG研究領域 腫瘤 心血管 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉導 激酶和磷酸酶 新陳代謝
人β-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)elisa分析檢測Anti-Mib1/Mindbomb研究領域 腫瘤 神經(jīng)生物學 信號轉導 通道蛋白 細胞膜受體 新陳代謝
大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)elisa試劑盒Anti-MAML1研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 神經(jīng)生物學 信號轉導 轉錄調(diào)節(jié)因子
McCoy's 5A*培養(yǎng)基(不含HEPES)?說明書Anti-MAML2研究領域 淋巴細胞 t-淋巴細胞 b-淋巴細胞
蛋白酶K使用說明書Anti-MAPK6/ERK3研究領域
大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa試劑盒Anti-MISRII/AMHR2研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 信號轉導 細胞凋亡 細胞類型標志物 細胞骨架 腫瘤細胞生物標志物 細胞外基質(zhì)
大鼠骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白elisa試劑盒Anti-Mst2研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 干細胞 細胞凋亡 糖蛋白 細胞類型標志物 t-淋巴細胞
35mm玻底培養(yǎng)皿使用說明書Anti-MUC13研究領域
人神經(jīng)干細胞無血清培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應Anti-MTERF1研究領域 神經(jīng)生物學 細胞粘附分子
WGA 糖蛋白分離試劑盒10 次哪里有賣Anti-MCT1研究領域 神經(jīng)生物學 信號轉導 通道蛋白
SYBR Green 1 熒光染料使用說明書Anti-MOF/KAT8/MYST1研究領域 信號轉導 轉錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
人結腸平滑肌細胞說明書Anti-MBOAT4/Ghrelin O acyltransferase研究領域 神經(jīng)生物學 信號轉導 激酶和磷酸酶
靛藍胭脂紅實驗步驟Anti-MHC class I/HLA-A研究領域 細胞生物 轉錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學
大鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)elisa試劑盒Anti-MHC Class II/ HLA-DMB研究領域 信號轉導 細胞骨架 細胞外基質(zhì)
環(huán)磷酸腺苷價格Anti-MS4A2研究領域 細胞生物 免疫學 神經(jīng)生物學 細胞膜受體
銀杏內(nèi)酯JMK(Midkine) 中期因子/肝素結合生長因子抗原TNFRSF12A/TWEAKR/CD266 腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體
特女貞苷MLC/Myosin light chain 3 peptide 肌球蛋白輕鏈3抗原TNFR2/TRAF2/CD120b 腫瘤壞死因子受體相關因子2抗體
京尼平苷酸MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 巨噬細胞移動抑制因子抗原TNFR1/TNF Receptor I 腫瘤壞死因子受體1抗體
川續(xù)斷皂苷乙MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta) 巨噬細胞炎癥因子1β 抗原TNFC/lymphotoxin Beta 腫瘤壞死因子C/淋巴毒素β抗體
山梔苷甲酯CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta) CD122/白介素2受體β鏈抗原TNF-alpha(1F6) 腫瘤壞死因子-α單克隆抗體
表告依春MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2) 巨噬細胞炎癥蛋白2抗原TNF-alpha 腫瘤壞死因子-α抗體
大車前苷MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原TNFAIP8 腫瘤壞死因子α誘導蛋白8抗體
8-O-乙酰山梔苷甲酯MMP-20(matrix metalloproteinase 20) 基質(zhì)金屬蛋白酶20抗原TNFAIP5/Pentraxin 3 腫瘤壞死因子α誘導蛋白5
晶蘭苷MMP-17(Matrix metalloproteinase-17) 基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗原TNFAIP3 interacting protein 3/ABIN3 腫瘤壞死因子α誘導相互作用蛋白3抗體
黃杞苷MMP-26(Matrix metalloproteinase-26) 基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗原TNFAIP3 腫瘤壞死因子α誘導蛋白3抗體
火雞支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格人β乳糖蛋白抗體IgGELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1750ku
人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT10克
人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT1克
人β細胞素(BTC)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
人γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT,避光100克
人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:保存:-20℃25毫克